《马里奥赛车DS》收录了原有的16条赛道外还加入了16条全新赛道，新赛道将十分具备创意，会有很多突如其来的障碍物阻碍玩家前进，但玩家可以利用NDS独特的双屏幕显示功能，利用下屏勉强继续进行游戏，NDS上屏显示游戏实时画面，下屏显示地图及状态画面。而《马里奥赛车DS》更支持一卡八人同时对战，只要有一合游戏卡就可以让八台NDS进行实时联机游戏。